第111回薬剤師国家試験
◆ 問114
抗原Xに結合する単クローン由来のヒト免疫グロブリン(IgG1)は、2本の重鎖(H鎖)と2本の軽鎖(L鎖)からなり、図1に示すように、2本の重鎖間と重鎖・軽鎖間に4つのジスルフィド結合を含み、分子量がほぼ同じ12個の構造単位で構成される。また、IgG1全体の分子量は約150kDaである。このIgG1分子を界面活性剤であるドデシル硫酸ナトリウムの存在下で熱変性させ、ポリアクリルアミドゲル電気泳動を行い、タンパク質に結合する色素(クマシーブリリアントブルー)で染色した。ジスルフィド結合を還元する2-メルカプトエタノールを加えて熱変性を行った場合と、加えないで熱変性を行った場合では、図2に示すように、泳動結果に違いがあった。ただし、バンド2とバンド3に含まれる分子数の比は1:1であった。

以下の記述のうち、正しいのはどれか。2つ選べ。
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2-メルカプトエタノールを加えて熱変性を行ったのは、実験2 である。
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バンド1 から抽出したタンパク質は、電気泳動前の IgG1 よりも強く抗原Xに 結合することができる。
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バンド2 、バンド3 の分子量は、それぞれ 100 kDa、50 kDa と見積もられる。
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バンド3 のタンパク質は、熱変性によって切断された重鎖の断片である。
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バンド2 とバンド3 のタンパク質は、いずれも抗原結合部位を含む。
◆ 問114
◆領域・タグ
◆正解・解説
正解:1、5
SDS-PAGEにおいて2-メルカプトエタノール(還元剤)を加えるとジスルフィド結合が切断されH鎖とL鎖に分離する。IgG1は約150 kDaでH鎖約50 kDa×2本、L鎖約25 kDa×2本からなる。還元条件下では2本のバンドが現れるため、バンド2・3を含む実験2が還元条件である(選択肢1が正しい)。H鎖もL鎖も可変領域を含むためいずれも抗原結合部位を含む(選択肢5が正しい)。バンド2・3の分子量は50 kDaと25 kDaであり100 kDaと50 kDaではない。
